單域抗體(納米抗體)定制服務

什么是單域抗體(納米抗體)

單域抗體(納米抗體)最早是由比利時科學家 Hamers 等1993 年在《Nature》首次報道。在羊駝外周血中存在一種天然缺失輕鏈的抗體,該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的CH2與CH3區,該抗體是已知的可結合目標抗原的最小單位。VHH晶體為2.5nm,長4nm,分子量只有15KD,因此也被稱作納米抗體(Nanobody或single domain antibody)。

單域抗體(納米抗體)的優勢與應用

由于單域抗體(納米抗體)擁有更長的CDR3區(納米抗體CDR3通常由16~24個氨基酸組成,傳統單抗CDR3僅有7~12個氨基酸),所以這種長CDR3結構有利于單鏈抗體結合抗原分子的隱蔽抗原表位,這也是提高單鏈抗體與抗原結合能力的主要原因,同時導致其結構非常穩定,能夠耐受高溫及苛刻的極端環境。與普通的Y型抗體相比,納米抗體結構簡單,易于進行抗體工程改造,更適于改造成單價、雙價、雙特異及多價抗體。同時納米抗體生產制備簡便,可用傳統的大腸桿菌表達體系進行制備,也可以使用酵母或哺乳動物細胞生產。納米抗體與人抗體重鏈氨基酸序列高度相似,因此易于進行人源化改造,目前逐漸成為新一代治療性生物醫藥與臨床診斷試劑中的新興力量。

單域抗體(納米抗體)獲得

為滿足工業客戶的需求,我們開發了基于Single B細胞克隆和酵母展示為基礎的的納米抗體篩選平臺以滿足不同客戶的需求。

技術路線一:基于Single B細胞克隆獲得納米抗體

ABexpressTM是我公司自主研發的抗體快速篩選平臺,該方案通過流式分選PBMC中對靶蛋白具有特異性結合的B細胞,并對對單個B細胞進行抗體編碼區域的測序最終獲得抗體序列信息。這種方法適用于任意動物抗體篩選,可一次性覆蓋全部靶向抗原特異性的B細胞,具有基因多樣性好、效率高的特點;并可避免使用噬菌體庫篩單克隆抗體過程中的假陽性,或非特異性結合等問題,可大大加速納米抗體篩選的速度。

技術流程:

納米抗體單個B細胞.jpg

技術路線二:基于酵母展示獲得納米抗體

噬菌體展示技術曾是獲得納米抗體序列的另一重要技術路徑,但部分抗體無法正確的與噬菌體衣殼蛋白融合并展示出來,且噬菌體自身與靶蛋白的非特異性結合也會影響后續篩選工作的進行。為避免此類問題的產生,我們將納米抗體展現于酵母表面,通過FACS分選陽性克隆后,通過測序可獲得多樣化的抗體序列。該方法可以極好的模擬所有納米抗體在細胞膜表面的結構,正確的反應納米抗體與抗原的結合情況,極少出現噬菌體展示庫常見非特異性結合的情況。在開展多個納米抗體篩選工作時,酵母展示庫技術更具有成本上的優勢。

技術流程:

酵母展示-1.jpg


  • PBMC處理

  • 抗體展示庫制備

  • 抗體篩選和親和力測定

  • 抗體功能鑒定

  • 20-26周交付

  • 目的基因信息

  • 重組蛋白

  • 重組抗體

  • 實驗報告

0086-512-62570431

[email protected]

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