酵母展示納米抗體篩選平臺

酵母表面展示(Yeast surface display)是一種真核蛋白表達系統,它是一類篩選蛋白突變體庫的高通量篩選方法,在抗體表達、體外成熟和篩選等研究中應用廣泛,具有高效、靈敏等特點。其基本原理是將外原靶基因與特定的載體基因序列融合后導入酵母細胞,用酵母細胞內蛋白轉運機制將靶蛋白轉移至細胞表面并固定在細胞膜上。

與傳統噬菌體展示技術相比,酵母表面展示系統是將隨機突變(random mutagenesis)和組合庫(combinatorial 1ibrary)結合,篩選具有特定性質的肽和蛋白質的新方法,它可以避免噬菌體自身與靶蛋白的非特異性結合,是噬菌體表面展示系統的重要補充。

酵母展示技術在納米抗體制備中的運用

在利用酵母展示系統獲得納米抗體的過程中,我們將納米抗體展現于酵母表面,通過FACS分選陽性克隆后,再通過測序可獲得多樣化的抗體序列。該方法可以極好的模擬所有納米抗體在細胞膜表面的結構,正確的反應納米抗體與抗原的結合情況,極少出現噬菌體展示庫常見非特異性結合的情況。此外,在開展多個納米抗體篩選工作時,酵母展示庫技術也更具成本上的優勢。


技術流程:




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